A l’état normal il est difficile d’estimer précisément le nombre et la taille des granulations dans le cytoplasme des PNN : il dépend du protocole de coloration MGG utilisé (parfois les colorations « rapides » ne colorent pas les granulations)
Chez le sujet sain les granulations primaires (= granulations azurophiles) sont colorées dans les myéloblastes et promyélocytes, et ne le sont plus à partir du stade myélocyte.
Les granulations secondaires commencent à apparaître au stade myélocyte et sont très majoritaires ensuite : elles sont colorées en marron, brun-lilas ou brun-rouge selon le protocole de coloration utilisé.
1. Défaut ou absence de granulations (hypogranulation)
Anomalie pas toujours facile à identifier, correspondant le plus souvent à un défaut de colorabilité des granulations secondaires.
N'a pas de lien avec le déficit en myéloperoxydase des neutophiles ( = déficit quantitatif ou qualitatif au sein des granulations primaires)
Défaut modéré (granulations + pâles) :
- grands états inflammatoires,
- carence en fer (et exceptionnel déficit en lactoferrine),
- infections aiguës bactériennes ou virales (avec ou sans autres anomalies quantitaiteves et/ou qualitaitves des neutrophiles)
Défaut sévère = signe de dysgranulopoïèse :
- Le cytoplasme présente parfois une couleur « ivoire » (blanc-jaunâtre)
- Anomalie isolée ou associée à d’autres anomalies nucléaires et/ou cytoplasmiques
- S'observe au cours de : SMD, SMD/SMP, et LAM (sans ou avec neutropénie).
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Remarques
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L'hypogranulation est parfois un problème purement technique, lié au MGG qui colore mal les granulations dans les zones les plus richement cellulaires des frottis : à évoquer devant une LMC très hyperleucocytaire ou un frottis médullaire très richement cellulaire)
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Certains automates apprécient la « granularité » des leucocytes analysés (critères électro-physiques), et proposent un seuil en-deçà duquel la population neutrophile est considérée comme hypogranulaire : le lien avec l'hypogranulation "morphologique" n'est pas constant.
2. Hypergranulation
Correspond à une colorabilité anormalement forte des granulations primaires et secondaires, leur membrane étant devenue plus perméable aux colorants.
- Les granulations paraissent plus grosses et plus nombreuses
- Cet aspect s'intitule également : "neutrophiles avec granulations toxiques »
- Anomalie portant sur un nombre variable PNN (parfois 100 %) : infections bactériennes
- Anomalie portant la quasi-totalité des PNN : traitement par G-CSF ou GM-CSF
- Anomalie décrite comme physiologique et parfois observée en fin de grossesse
- Situations exceptionnelles :
- PNN hypergranuleux + hyperéosinophilie : évoque un syndrome hyperéosinophile (anomalie FIP1L1-PDGFRa)
- Anomalie d’Alder observée au cours de certaines mucopolysaccharidoses (l'hypergranularité peut aussi être considérée comme des granulations anormales)
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3. Inclusions bleutées dans les neutrophiles matures : corps de Döhle et corps de May-Hegglin
Ces deux inclusions se ressemblent beaucoup et leur présence s'interpréte en fonction du contexte.
Corps de Döhle :
- Petite inclusion bleue (0.5 – 1µm de diamètre) intracytoplasmique
- Correspond à un reliquat de l’ARN des précurseurs myéloïdes
- On en observe 1 à 3 par PNN
- On signale leur présence si le nombre de PNN concernés est ≥ 2 %
- On les observe principalement au cours des :
- infections sévères
- grandes régénérations médullaires
- syndromes myélodysplasiques.
- Remarque : disparaissent rapidement si contact prolongé avec l’EDTA du tube de prélèvement
Corps de May-Hegglin :
- inclusion bleutée (parfois très pâle) en général unique (ressemble à un corps de Döhle)
- au cours de la maladie de May-Hegglin (Syndrome MYH9) : thrombopénie constitutionnelle à plaquettes géantes
- au cours d'autres macrothrombopénies constitutionnelles rarissimes
- S'observe dans la quasi-totalité des PNN et des éosinophiles (les monocytes et lymphocytes contiennent aussi également un corps de MH, mais visible uniquement au microscope électronique)
- Remarque. Parfois les PNN présentent une petite région sous-membranaire d’aspect +/- bleuté et dépourvue de granulations, correspondant vraisemblablement à un pseudopode (sans spécificité) : ne pas confondre
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| Corps de Döhle : infection bactérienne | Corps de May-Hegglin : macrothrombopénie constitutionnelle |
4. Granulations anormales
4.1. Maladies constitutionnelles.
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Maladie de Chediak-Higashi : volumineuses inclusions rougeâtres ou +/- marron (avec neutropénie), visibles également dans une partie des autres leucoctes sanguins.
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Anomalie d'Alder : mucopolysaccharidoses (cf plus haut : hypergranulation)
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4.2. Pathologie acquise
Bâtonnets ou corps d’Auer
- Inclusions anormales formées par la concrétion de plusieurs granules primaires
- Correspondent à de petits bâtonnets rouges (2 – 4 µm de long, très minces le plus souvent)
- S'observent uniquement en pathologie tumorale, signe du caractère myéloïde de l'hémopathie
- Selon leur nombre dans des blastes :
- Un à quatre bâtonnets d'Auer dans un nombre variable de blastes (de < 1/1000 à > 20 % des blastes) : LA myéloblastiques, LA myélomonocytaires
- Disposition en fagots : au moins 5 bâtonnets d'Auer par blaste (jusqu'à 50 % de blastes concernés) : LA à promyélocytes
- Plus rarement : 1 ou quelques corps d'Auer dans quelques blastes au cours de syndromes myélodysplasiques
- Leur présence dans des neutrophiles matures s'observe au cours :
- des LA myéloblastiques, souvent avec t(8 ;21)
- des LA promyélocytaires en cours de traitement différenciant (ATRA)
Bactéries intraleucocytaires
- Aussi bien cocci que bacilles, présentes dans des vacuoles hétérogènes en taille et forme
- Les PNN sont souvent très altérés, déformés, +/- lytiques, parfois regroupés en amas
- Leur présence est évocatrice de sepsis très sévère (< 1% jusqu'à > 10 % de PNN contenant une ou plusieurs bactéries)
- Remarque : parfois artéfact, si bactéries préalablement présentes dans un tube de prélèvement non stérile
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Inclusion arrondie violacée ressemblant morphologiquement à un corps de Howell –Jolly
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Fragment d’ADN ou chromosome sphérisé (coloré par la réaction de Feulgen)
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En général unique, et présent dans le cytoplasme d'un petit nombre de PNN (1 - 5 %)
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Observable au cours de :
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Infection VIH : observée dans environ 12% des cas de SIDA (patients traités, parfois patients non traités) (Slagel AJCP 1994, 101 : 429-431)
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Conséquence de diverses chimiothérapies (mycophénolate mofetil, tacrolimus, chrorambucil, azathioprine, autres)
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Plus exceptionnel : myélodysplasies
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Autres types d’inclusions
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Cristaux de médicaments, de bilirubine, de cystine, hémozoïne (pigment du paludisme), mélanine (mélanomes), GR (AHAI), cryoglobulines.
5. Présence de vacuoles cytoplasmiques
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PNN avec vacuoles variables en Nb et en taille, avec parfois tendance à la confluence
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Observés surtout dans le sepsis sévère, avec souvent d'autres anomalies nucléaires et/ou cytoplasmiques associées (rechercher attentivement la présence d'éventuelles bactéries)
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PNN avec vacuoles en nombre très élevé (jusque 20-30/ PNN), de taille +/- identique
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Observés en association à la prise de toxiques, l'intoxication aiguë éthylique, le sepsis sévère
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La présence de vacuoles cytoplasmiques a également été rapportée au cours de cryoglobulinémies, de la dystrophie musculaire progressive (anomalie de Jordan), après traitement par G-CSF ou GM-CSF
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Remarque : une vacuole (ronde, transparente) est occasionnellement visible dans quelques PNN normaux (= mitochondrie dilatée)
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On retiendra
Défaut de granulations (= défaut de colorabilité)
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Infections / inflammations
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SMD, LA
Excès de granulations (=hypercoloration des granulations) :
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Infections (surtout bactériennes)
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Traitement G-CSF, GM-CSF
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Maladies exceptionnelles
Inclusions anormales :
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Corps de Döhle (infections/régénérations)
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Corps de May-Hegglin (Syndrome MYH9, macrothrombopénie contitutionnelle)
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Maladie de Chédiak Higashi
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Corps d’Auer (blastes, PNN)
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Inclusion proche d’un corps de Howell-Jolly : VIH, chimiothérapies
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Vacuoles (infection sévère, alcoolisme aigu)
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Bactéries intraleucocytaires
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Débris divers intracytoplasmiques (cristaux, GR, hémozoïne, …)