Leucocytes sanguins
Il existe 5 catégories de leucocytes observables sur un frottis sanguin normal :
- Polymucléaires neutrophiles (ou granulocytes neutrophiles)
- Polynucléaires éosinophiles (ou granulocytes éosinophiles
- Polynucléaires basophiles (ou granulocytes basophiles)
- Lymphocytes
- Monocytes
Polynucléaires neutrophiles (PNN)

- diamètre moyen = 15 µm
- Noyau segmenté (2 à 5 lobes); chromatine rouge foncé, condensée en mottes
- Cytoplasme abondant, nombreuses granulations brunes / brun-lilas sur fond clair discrètement rosé
Polynucléaires neutrophiles (PNN)

Chez l'adulte sain :
- Environ 40 % des PNN ont 3 lobes nucléaires, souvent bien individualisés, reliés entre eux par un fin fil de chromatine
- On les appelle indifféremment polynucléaires (= noyau polylobé) ou granulocytes (= granulations) neutrophiles
Polynucléaires neutrophiles (PNN)

PNN avec 4 lobes nucléaires
- Environ 15-20 % des PNN de l'adulte sain
- Les lobes ne sont pas tous de taille identique
Polynucléaires neutrophiles (PNN)

PNN avec 5 lobes nucléaires
-
Au maximum 2 % des PNN du sujet sain ont 5 lobes ou plus
Polynucléaires neutrophiles (PNN)

PNN avec 2 lobes nucléaires
- Environ 35 % des PNN chez le sujet sain
Polynucléaires neutrophiles (PNN)

Trois PNN
- Les lobes nucléaires sont +/- bien individualisés d'une cellule à l'autre
Polynucléaires neutrophiles (PNN)

Trois PNN
- Les lobes nucléaires sont +/- bien individualisés
- (lobulation nucléaire = mécanisme aléatoire qui correspond au pincement du noyau allongé du métamyélocyte dans 1, 2 ou 3 régions)
Polynucléaires neutrophiles (PNN)

Les granulations cytoplasmiques :
- Les granulations neutrophiles sont nombreuses (>100), +/- nettement visibles et +/- nettement individualisables
- Chez un patient donné il existe à l'état normal de petites différences dans le nombre et la coloration des granulations d’un PNN à l’autre
Polynucléaires basophiles

-
Taille proche de celle du PNN
-
Noyau polylobé mal visible car +/- totalement recouvert de volumineuses granulations violet foncé (= basophiles), remplissant la totalité de la cellule
-
Nombre faible chez le sujet sain (< 1%) : on n'en observe pas constamment en examinant 100 cellules sur un frottis sanguin normal
Polynucléaires éosinophiles

- Taille proche de celle d’un PNN : 12 – 15 µm de diamètre.
- Noyau bien visible, souvent bilobé (parfois trilobé)
- Cytoplasme caractéristique : rempli de volumineuses granulations orangées juxtaposées les unes aux autres (le protoplasme est peu visible, incolore ou un peu bleuté)
Polynucléaires éosinophiles

- Identification facile : cytoplasme rempli de volumineuses granulations orangées nettement individualisées
- La couleur orangée varie un peu selon le pH des colorants : elle correspond à la fixation de l’éosine contenue dans le MGG.
Monocytes

- Les plus grandes cellules du sang normal (diamètre : 18-25 µm)
- Rapport N/C = 0.5-0.6
- Noyau allongé et irrégulièrement contourné (réniforme, serpentiforme, en chaine de montagne,…), mais sans lobes individualisés (= différence avec le PNN)
- Chromatine violacée, dessin plus fin que celui du PNN (pas de « mottes »)
- Cytoplasme gris – bleu (« gris ciel d’orage »), avec texture « floconneuse »
- Quelques granulations fines, rougeâtres, à peine visibles (= fine « poussière de granulations »)
Monocytes

- Plus grandes que les PNN (capacité plus grande d’étalement sur lame de verre)
- Noyau : contour irrégulier mais sans lobes reliés par un fil de chromatine,
- Cytoplasme plus gris-bleu que rosé
- Taille, lobulation du noyau et couleur du cytoplasme sont 3 différences notables entre monocytes et PNN
Monocytes

- Cytoplasme : texture dense et non unie (« floconneuse »), de couleur gris-bleu;
- Granulations : à peine visibles dans 3/4 des monocytes sanguins normaux (« poussière de granulations » = on les devine plus qu’on ne les voit)
- Parfois nettement visibles, comme sur cette image (1/4 des monocytes sanguins normaux; certains les appellent monocytes plus jeunes, ou activés)
Monocytes

Monocytes : les vacuoles cytoplasmiques sont inconstantes
- Souvent une ou quelques unes, isolées ou regroupées (= confluentes),
- Nombre et taille variables au sein du même monocyte et d’un monocyte à l’autre chez un patient donné
- Le nombre de vacuoles augmente avec le temps si le frottis a été réalisé avec du sang EDTA et étalement retardé (vacuolisation nette si > 3-4 heures après le prélèvement).
Lymphocytes

Petits lymphocytes :
- cellules arrondies, 9-12 µm de diamètre
- noyau arrondi ou ovalaire occupant la majorité de la cellule (rapport N/C = 0.8-0.9)
- chromatine sombre, rouge violet foncé, dense, avec QQ craquelures +/- nettes
- cytoplasme réduit, basophile (ou bleu-gris), sans granulations
Lymphocytes

3 lymphocytes
- Noyau arrondi avec chromatine dense
- parfois on devine un discret nucléole, mais à peine visible et petit
Lymphocytes

Grands lymphocytes :
- Cellules arrondies ou +/- quadrangulaires; 12 – 15 µm de diamètre
- Différences avec le petit lymphocyte :
- Noyau ovalaire avec chromatine un peu moins condensée, mais avec sillons ou craquelures (« aspect peigné ») ; rapport N/C = 0.5 – 0.6.
- Cytoplasme nettement visible, incolore ou légèrement bleuté (presque transparent)
- Parfois membrane externe très discrètement soulignée en bleu.
Lymphocytes

Grands lymphocytes
- Celui de gauche montre un très discret nucléole, au sein d’un noyau à chromatine « mature »
Lymphocytes

Grands lymphocytes avec granulations cytoplasmiques ou « grands lymphocytes granuleux »
- 0.1 – 0.4 G/L des lymphocytes sanguins
- les granulations sont :
- azurophiles (rouges), de petite taille, nettement visibles sur le fond clair du cytoplasme
- bien individualisées : on peut les « compter » (5 à 30 par cellule), à la différence des granulations des monocytes
Lymphocytes
- Lors de la réalisation de la formule leucocytaire on regroupe tous les lymphocytes en une seule catégorie, indépendamment de leur petite ou grande taille.
- Les petits lymphocytes s’identifient assez facilement : taille un peu supérieure celle d’une hématie, noyau rond, quasi-absence de cytoplasme
- Les grands lymphocytes sont parfois un peu difficiles à séparer des monocytes...
Lymphocytes

Différences lymphocytes – monocytes :
- Noyau :
- lymphocytes = noyau arrondi
- monocytes = noyau de contour plus irrégulier
- Cytoplasme :
- grands lymphocytes = clair, parfois presque transparent
- monocytes = gris-bleuté, texture dense
- Granulations :
- lymphocytes = grains en nombre limité (30 maxi), nettement individualisables (= on peut les compter)
- monocytes = moins nettement individualisables (on les « devine » car leur taille est à la limite de la visibilité dans > ¾ des monocytes)
Conclusion
Entraînez-vous maintenant de 2 manières :
- en consultant les exercices d’identification des leucocytes sanguins
- en regardant des frottis sanguins « normaux » au microscope :
- examinez chaque leucocyte comme il se présente sous l’objectif du microscope,
- identifiez-le et retenez ses critères marquants; comparez la taille à celle des GR
- appréciez les différences avec la description théorique, car tous les leucocytes ne présentent pas une morphologie caricaturale
- observez plusieurs PNN, lymphocytes et monocytes avant de débuter le décompte